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上海闪谱蛋白纯化系统助力中科院博士后发表重大成果
点击次数:2088 发布日期:2019-7-15  来源:本站 本站原创,转载请注明出处
2019年6月28日,广州市妇女儿童医疗和中科院巴斯德研究所联合博后汤书兵老师在《Nano Letters》杂志上发表了科学文章——《 Versatile functionalization of ferritin nanoparticles by intein-mediated trans-splicing for antigen/adjuvant co-delivery 》。
 

图1. 闪谱ClearFirst-3000型蛋白纯化系统助力高水平论文发表
 
自组装蛋白纳米颗粒拥有高度均一的结构、良好的生物相容性和极好的可塑性等天然性优势,越来越广泛和深入地被设计改造,用于整合佐剂和抗原,以激发持久有效的免疫应答。然而,基于表面修饰功能化纳米颗粒有两个常见问题:(1)负载物时常引起纳米颗粒解聚;(2)抗原与佐剂难以用传统的基因融合技术共递送。该论文报道了一种基于内涵肽介导的反式剪接方法,克服了负载蛋白对铁蛋白纳米颗粒稳定性的不利影响,并允许在同一个纳米颗粒表面以一种便捷、高效、特异的方式共展示抗原和佐剂。该研究以一种表位抗原为模型,揭示了抗原和佐剂共给药纳米颗粒比其他剂型可诱导更为高效的保护性免疫。实验结果表明蛋白质编辑可作为一种应用前景广阔的技术共递送抗原/佐剂以增强抗原相关免疫应答。

上海巴斯德研究所钱志康课题组联合博后汤书兵老师使用上海闪谱生物科技有限公司ClearFirst-3000型蛋白纯化系统从反应后溶液中高效纯化分离出了多种不同功能的嵌合型纳米颗粒,其中包括纳米疫苗SP70-HFT(图2、3)、纳米佐剂rhizavidin-HFT(图4、5;rhizavidin为单体抗生物素蛋白,用以结合生物素化的CpG)、共递送纳米颗粒(图6、7)SP70/rhizavidin-HFT等,并比较了它们对免疫反应的影响,发现抗原/佐剂共输送的纳米颗粒SP70/CpG-HFT可增强与抗原偶联的免疫反应。以下结果为本论文中利用ClearFirst-3000型蛋白纯化系统纯化的不同功能的纳米颗粒和ClearFirst-3000型蛋白纯化系统。
 

图2. 在闪谱ClearFirst-3000型蛋白纯化系统上基于凝胶过滤法从反应后溶液中分离纯化纳米疫苗SP70 /HFT的UV图谱(摘自Figure 3d)

图3.  Tricine-SDS-PAGE检测凝胶过滤法从反应后溶液中分离纯化纳米疫苗SP70-HFT (摘自Figure 3c)


图4. 在闪谱ClearFirst-3000型蛋白纯化系统上,基于凝胶过滤法从反应后溶液中分离纯化纳米佐剂rhizavidin-HFT的UV图谱(摘自Figure S5h)


图5. Tricine-SDS-PAGE检测凝胶过滤法从反应后溶液中分离纯化纳米佐剂rhizavidin-HFT(摘自Figure S5g)

       图6. 在闪谱ClearFirst-3000型蛋白纯化系统上,基于凝胶过滤法从反应后溶液中分离纯化共递送纳米制剂SP70/rhizavidin-HFT的UV图谱(摘自Figure S6b)


图7. Tricine-SDS-PAGE检测凝胶过滤法从反应后溶液中分离纯化共递送纳米制剂SP70/rhizavidin-HFT (摘自Figure S6a)

图8. 闪谱ClearFirst-3000型蛋白纯化系统
 
该文章一经发表便引起整个行业的广泛关注,文章影响因子高达12.2分。上海巴斯德研究所钱志康老师和博后汤书兵老师是本次研究课题队伍的核心人物。汤书兵老师研究方向是开发全新的模块纳米颗粒递进技术,用于疫苗研发、个性化肿瘤治疗等,致力于推动人类生命健康发展,不断地进行科学技术攻关。
 

图9. 文章作者汤书兵老师
 
钱志康老师1996年7月毕业于复旦大学生物化学系,获学士学位;2005年1月毕业于复旦大学生命科学学院,获博士学位。2005年6月至2012年3月在美国华盛顿大学医学院微生物系先后为博士后,研究员(Staff scientist)。现任中国科学院上海巴斯德研究所疱疹病毒分生物学研究组组长,研究员,博士生导师。 从事人类重要病毒学研究十余年,主要工作集中在人巨细胞病毒(HCMV)的分子生物学及其与宿主相互作用的研究,已在Journal of Virology, PLoS Pathogens 等权威国际学术刊物上发表论文10余篇,申请专利6项,获授权专利4项。近五年承担了国家自然科学基金、国家科技部重大专项,国家重大基础研究,中科院重点项目,是美国微生物协会和病毒学协会会员。
 

图10:文章作者钱志康老师
 
本次课题研究使用的是上海闪谱生物科技有限公司的ClearFirst-3000型蛋白纯化系统,该仪器主要应用于大型生命科学实验室的蛋白纯化工作,与传统方法相比,极大提高了纯化工作的效率,节约大量的人力物力。上海闪谱生物科技有限公司是国内知名分析仪器公司投资的,以留学人员为主体的高科技公司,专注于蛋白纯化系统和酶标仪等生命科学仪器的研发生产,致力于为生命科学工作者提供优质的科学仪器。上海闪谱生物科技有限公司与广州市妇女儿童医疗中心和中科院巴斯德研究所共同合作促进了本次课题研究的成功,以后上海闪谱会继续提供优质的生命科学仪器,为推动中国的生命科学研究不断进步!
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