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​大鼠ELISA试剂盒通用操作说明
点击次数:830 发布日期:2019-7-16  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
大鼠ELISA试剂盒操作说明 
每一次提醒你总能默默地记住,每一项任务你都会静静地完成,对自己及时反省让你慢慢地进步,望你带着这些好的品质去新的天地开拓,一定会有丰厚的收获。小编为大家介绍 大鼠ELISA试剂盒操作说明 
操作步骤:
 
1.   标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为24ng/L,16ng/L ,8ng/L,4ng/L, 2ng/L)。
 
2.   加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
 
3.   温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
 
4.   配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
 
5.   洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
 
6.   加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
 
7.   温育:操作同3。
 
8.   洗涤:操作同5。
 
9.   显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
 
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
 
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
来源:上海邦景实业有限公司
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